产品货号:
KD0708
中文名称:
福林酚
英文名称:
Folin-Ciocalteu's Phenol Reagent
产品规格:
50mL|50mL×10|100mL|100mL×10|250mL|500mL|500mL×5
发货周期:
1~3天
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Folin -酚试剂的配制
1.Folin-酚A试剂(需自备)
将1g Na2CO3溶于50mL 0.2mol/L NaOH中;再把0.5g(硫酸铜)CuSO4·5H2O溶于100mL 1%的酒石酸钾钠(或酒石酸钠)溶液;然后将前者50mL与后者1mL混合,此试剂只能用一天,过期失效。
2.Folin-酚B试剂(KD0708)本试剂的浓度为1mol/L,此为应用液。
操作方法:
1.标准曲线的制作
取14支试管分成两组,分别加入0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1mL标准蛋白质溶液(250μg/ml),用水补足到1mL,加入5mL试剂甲,混匀,于20~25℃放置10分钟,再加入0.5mL试剂乙,立即摇匀,在20~25℃保温30分钟,于500nm处比色。测定光密度值,取两组测定的平均值,以蛋白质浓度为横坐标,光密度值为纵坐标,绘制标准曲线值为定量的依据。
2.样品测定
取1mL样品溶液(约合20~250μg/多肽或蛋白质)加入5mL A试剂混匀,于20~25℃放置10分钟,再加0.5mL B试剂(Folin-酚),立即摇匀,在20~25℃保温30分钟,于500nm比色,以1mL水代替样品作空白对照。测定后,可以在标准曲线中查出未知样品的浓度。
若用0.5cm光程的比色杯进行比色,可按下面方法进行操作:取0.2mL样品溶液(约含5~100μg多肽或蛋白质)加入1mL A试剂(可选用0.3-0.5cm直径的小试管)混匀,10分钟以后,再加入0.1mL B试剂,立即混匀,30分钟后比色。多肽或蛋白质的浓度在2~25μg,测波长755nm,而25μg以上则采用500nm比色为宜。
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